超滤技术分离制备小麦蛋白肽项目通过鉴定
2014-05-17 16:24:53
admin
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据中国生物技术信息网2008年9月2日讯 日前，由江南大学承担的小麦蛋白肽制备新技术通过了教育部科技发展中心组织的鉴定 。据悉，本项目以小麦面筋蛋白为原料 ，采用现代生化分离手段结合酶技术对小麦面筋蛋白中的酶解产物进行分离提取 、富集纯化 ，并对其生物学特性进行研究 ，提出以小麦面筋蛋白为原料深度开发具有明确阿片活性和氨基酸序列的小麦蛋白功能肽的新思路，为提高小麦面筋蛋白的利用率提供了新的方法 ，填补了国内在这一领域的空白。
项目采用碱性蛋白酶 、胃蛋白酶、复合蛋白酶（胃蛋白酶＋胰蛋白酶）水解制备得到了三种面筋蛋白酶解物（AWGH、PWGH和PPWGH）经豚鼠回肠离体检定和NG108-15细胞生物学检定 ，均具有较好的阿片活性，其IC50值分别为1.21±0.25、1.57±0.21和1.29±0.38mg蛋白/mL。AWGH对腺苷酸环化酶（AC）的活性具有刺激作用 ，而PWGH和PPWGH则对AC的活性具有抑制作用，其AC抑制率分别为39.66%和50.13%。AWGH和PPWGH经过特定离子交换树脂脱盐处理和超滤处理后 ，所得小麦面筋蛋白源阿片肽蛋白质含量提高到90%以上 ，且阿片活性有较大的提高，AWGH和PPWGH的IC50值分别约减小至处理前的1/2和1/3。通过凝胶过滤色谱、半制备RP-HPLC和RP-HPLC分离纯化 ，从AWGH中得到一个具有较强阿片活性的组分AWGH-C14-1 ，从PPWGH中得到两个具有较强阿片活性的组分PPWGH-c4-1和PPWGH-c10-2，其氨基酸序列分别为LSPHK、GCKSPH和APSAPT。